Costruzione di un clone molecolare di un isolato del virus dell'immunodeficienza felina e sua caratterizzazione in vitro

Questa tesi si è incentrata nella costruzione di un clone molecolare dell’isolato locale FIV M2 di sottotipo B e nella sua caratterizzazione in vitro. Il DNA provirale è stato estratto da diversi tessuti linfoidi prelevati da un gatto infettato da FIV M2 e deceduto per complicazioni respiratorie. Sono state sviluppate idonee strategie di amplificazione e clonaggio dell’intero genoma provirale. Per analizzare la capacità replicativa in vitro del clone prodotto, quest’ultimo è stato trasfettato sulla linea cellulare di fibroblasti felini Crandell. Il virus rilasciato nel surnatante è stato raccolto ed usato per infettare la linea MBM di linfoblasti felini. Il rapido e costante aumento della p25 nel sovranatante ha suggerito che il clone molecolare prodotto è replicazione competente. Questo dato è stato verificato mediante propagazione a lungo termine in vitro in cellule MBM. A questa fase seguirà la caratterizzazione delle proprietà replicative e patogenetiche in vivo