Il melanoma e il glioma sono caratterizzati da un'attiva produzione di molecole pro-angiogeniche. E' stato osservato come i "media" condizionati di coltura (CM), preparati da cellule di melanoma SK-MEL28 e OCM-1 e da cellule di glioma C6, incrementano significativamente la proliferazione e la migrazione delle cellule endoteliali (ECs). Il CM di entrambi i tipi tumorali determina un notevole aumento nel "release" di acido arachidonico dalle ECs. L'effetto dei CM del melanoma e del glioma e' marcatamente ridotto in presenza di inibitori della fosfolipasi A2 citosolica (cPLA2) e calcio-indipendente (iPLA2), della cicloossigenasi-2 e di alcune proteinchinasi. In cellule endoteliali immortalizzate (GP8.3), l'attivita' di cPLA2 e iPLA2 e la fosforilazione di cPLA2, stimolata significativamente dopo 24 h di incubazione con i CM, sono attenuate dagli inibitori degli enzimi PLA2, PI3-K, MEK-1 ed ERK1/2. Il CM da entrambi i tipi tumorali incrementa anche la proliferazione e la migrazione delle cellule endoteliali primarie di microcapillari cerebrali di bovino. Mediante la microscopia confocale e' stato osservato un marcato aumento del segnale di fluorescenza per gli enzimi fosfo-cPLA2, fosfo-ERK1/2, fosfo-PKC-alfa, COX-2 e iPLA2, nelle ECs trattate in presenza dei CM da tumore. L'elettroporazione con anticorpi diretti contro iPLA2 e cPLA2 e la trasfezione di siRNA specifici inibisce significativamente la migrazione e la proliferazione cellulare di ECs. L'incubazione delle ECs con i "media" condizionati o con il peptide VEGF, in presenza di anticorpi diretti contro il VEGF e i suoi recettori VEGFR1/2, riduce fortemente l'aumentato tasso mitotico, la migrazione cellulare e i livelli delle proteine fosfo-cPLA2 e iPLA2. I dati suggeriscono che l'attivita' delle PLA2 e' coinvolta nella stimolazione della proliferazione e della migrazione delle ECs in presenza dei "media" condizionati da melanoma e da glioma e che la cPLA2 e' positivamente regolata a monte dalla cascata PI3-K, PKC-alfa ed ERK1/2. Queste vie di segnale rappresentano potenziali "targets" terapeutici per inibire o potenziare l' angiogenesi tumorale.
Ruolo delle fosfolipasi A2 nella risposta angiogenica indotta da linee tumorali in cellule endoteliali
2011
Abstract
Il melanoma e il glioma sono caratterizzati da un'attiva produzione di molecole pro-angiogeniche. E' stato osservato come i "media" condizionati di coltura (CM), preparati da cellule di melanoma SK-MEL28 e OCM-1 e da cellule di glioma C6, incrementano significativamente la proliferazione e la migrazione delle cellule endoteliali (ECs). Il CM di entrambi i tipi tumorali determina un notevole aumento nel "release" di acido arachidonico dalle ECs. L'effetto dei CM del melanoma e del glioma e' marcatamente ridotto in presenza di inibitori della fosfolipasi A2 citosolica (cPLA2) e calcio-indipendente (iPLA2), della cicloossigenasi-2 e di alcune proteinchinasi. In cellule endoteliali immortalizzate (GP8.3), l'attivita' di cPLA2 e iPLA2 e la fosforilazione di cPLA2, stimolata significativamente dopo 24 h di incubazione con i CM, sono attenuate dagli inibitori degli enzimi PLA2, PI3-K, MEK-1 ed ERK1/2. Il CM da entrambi i tipi tumorali incrementa anche la proliferazione e la migrazione delle cellule endoteliali primarie di microcapillari cerebrali di bovino. Mediante la microscopia confocale e' stato osservato un marcato aumento del segnale di fluorescenza per gli enzimi fosfo-cPLA2, fosfo-ERK1/2, fosfo-PKC-alfa, COX-2 e iPLA2, nelle ECs trattate in presenza dei CM da tumore. L'elettroporazione con anticorpi diretti contro iPLA2 e cPLA2 e la trasfezione di siRNA specifici inibisce significativamente la migrazione e la proliferazione cellulare di ECs. L'incubazione delle ECs con i "media" condizionati o con il peptide VEGF, in presenza di anticorpi diretti contro il VEGF e i suoi recettori VEGFR1/2, riduce fortemente l'aumentato tasso mitotico, la migrazione cellulare e i livelli delle proteine fosfo-cPLA2 e iPLA2. I dati suggeriscono che l'attivita' delle PLA2 e' coinvolta nella stimolazione della proliferazione e della migrazione delle ECs in presenza dei "media" condizionati da melanoma e da glioma e che la cPLA2 e' positivamente regolata a monte dalla cascata PI3-K, PKC-alfa ed ERK1/2. Queste vie di segnale rappresentano potenziali "targets" terapeutici per inibire o potenziare l' angiogenesi tumorale.I documenti in UNITESI sono protetti da copyright e tutti i diritti sono riservati, salvo diversa indicazione.
https://hdl.handle.net/20.500.14242/232725
URN:NBN:IT:UNICT-232725