Development of PNA-based systems for food safety and molecular biology

Il presente lavoro di tesi àƒ¨ stato incentrato sullo sviluppo di metodi per applicazioni riguardanti la sicurezza alimentare e la biologia molecolare. Lࢠanalisi di norovirus àƒ¨ stata studiata mediante metodi basati sullࢠutilizzo di Acidi Peptido Nucleici (PNA): i) un PNA-microarray àƒ¨ stato sviluppato per lࢠanalisi e la determinazione del genogruppo di norovirus; ii) sonde a PNA coniugate con arancio di tiazolo (TO) sono state sviluppate ed utilizzate per lࢠanalisi di norovirus mediante un metodo isotermo di amplificazione, analizzando gli amplificati costituiti da RNA; iii) un nuovo approccio per la concentrazione di norovirus dallࢠacqua e sucessiva analisi mediante real time RT-PCR àƒ¨ stato investigato. Piàƒ¹ in generale, sonde a PNA coniugate con pirene sono state sviluppate per lࢠanalisi di sequenze specifiche e per la determinazione di ࢠpolimorfismi a singolo nucleotideࢠ(SNPs). In particolare, un sistema basato su una coppia di sonde àƒ¨ stato utilizzato per lࢠanalisi del polimorfismo PTPN22 C1858T, implicato in svariate malattie autoimmuni incluso il diabete di tipo 1.