Costruzione di chimere molecolari dell'enzima Integrasi di HIV con attività idrolizzante delle LTR virali.

La Sindrome da Immunodeficienza Acquisita (AIDS o SIDA) causata da HIV-1 (Virus dell'Immunodeficienza umana) ਠcaratterizzata dalla graduale compromissione del sistema immunitario del soggetto colpito. Le attuali terapie farmacologiche, purtroppo, non riescono a eliminare l'infezione a causa della comparsa di continui ceppi resistenti ai farmaci, e inoltre questi trattamenti non sono in grado di eliminare i reservoir virali latenti e permettere l'eradicazione definitiva del virus dall'organismo. E' in questo ambito che si colloca il progetto a cui ho lavorato principalmente in questi anni, cioਠla creazione di una strategia per eradicare il provirus di HIV integrato nel genoma della cellula ospite. L'Integrasi di HIV-1 ਠun enzima che media l'integrazione del cDNA virale nel genoma della cellula ospite. La nostra idea ਠstata, quindi, quella di associare all'attività  di legame dell'IN stessa, un'attività  catalitica. A tal fine abbiamo creato una proteina chimerica costituita da un dominio DNA-binding, dato dall'Integrasi, e da un dominio con attività  nucleasica fornito dall'enzima FokI. La chimera ottenuta ਠstata sottoposta a mutagenesi random mediante UV, ed ਠstata oggetto di selezione in vivo, al fine di ottenere una chimera capace di riconoscere, specificamente le LTR di HIV-1, e idrolizzare i siti di inserzione. Questo lavoro porterà  a definire pertanto se l'IN di HIV puಠessere riprogrammata a catalizzare una nuova funzione mediante la sostituzione dell'attività  del proprio dominio catalitico con quello di FokI.