Characterization of Neisseria meningitidis GNA2132 antigen, a heparin binding protein cleaved by meningococcal NalP protease

RIASSUNTO GNA2132 (Genome-derived Neisseria Antigen 2132), una proteina scoperta tramite la Reverse Vaccinology, è una lipoproteina esposta sulla membrana esterna di Neisseria meningitidis. La proteina è in grado di indurre anticorpi battericidi contro la maggior parte dei ceppi di meningococco e per questa ragione è stata inclusa da Novartis nel vaccino contro meningococco serogruppo B. In questo studio abbiamo descritto come in meningococco GNA2132 è tagliata appena prima della regione ricca in arginine ed un frammento corrispondente alla porzione C-terminale della proteina è rilasciato nel supernatante di coltura. Tramite un approccio genetico abbiamo dimostrato che il taglio di GNA2132 è un processo ceppo-dipendente. Inoltre abbiamo dimostrato che il processamento di GNA2132 correla con l’espressione di NalP, un autotransporter ad attività serino-proteasica, la cui espressione subisce variazione di fase e che è in grado di modulare il processamento di altri fattori di virulenza di meningococco. GNA2132 contiene una regione ricca in arginine che analisi di sequenza hanno dimostrato essere altamente conservata in moltissimi ceppi di meningococco. I nostri studi sulla funzione della GNA2132 e dei frammenti generati indicano che la GNA2132 è capace di legare l’eparina e mostrano come questa regione sia fondamentale nel legame: infatti il frammento privo della regione ricca in arginine e le proteine ricombinanti (priva della zona in arginine oppure mutata nelle arginine) non mostrano avere il fenotipo di legame all’eparina.