PROTEIN PROFILES AND BIOCHEMICAL CHARACTERISTICS OF SEMEN: INFLUENCE ON FROZEN-THAWED SPERMATOZOAL QUALITY IN RAMS (OVIES ARIES) AND ALPACAS (VICUGNA PACOS)

Il plasma seminale è un fluido biologico complesso ed è conosciuto come una base nutritiva e protettiva degli spermatozoi. Alcuni componenti del plasma seminale sono di particolare importanza per il metabolismo spermatico, per la funzione, sopravvivenza e trasporto di queste cellule all'interno dell'apparato riproduttore femminile. Si conosce ancora poco come migliorare da un punto di vista biochimico e biofisico il plasma seminale. Nei camelidi, in particolare, l'origine non è conosciuta. Quindi, una serie di esperimenti sono stati condotti per studiare la composizione biochimica del plasma seminale negli arieti e negli alpaca e la relazione tra le caratteristiche biochimiche e la qualità e congelabilità spermatica. Nel primo esperimento, come studio di base, si sono usati due successivi eiaculati raccolti da arieti riproduttori di razza Sarda per osservare l'influenza del tipo di eiaculato sulla congelabilità degli spermatozoi. Si è osservato una più alta % di motilità spermatica nel post-scongelamento dei campioni raggruppati di primo e secondo eiaculato. Nel secondo esperimento, sono stati considerati eiaculati raccolti da arieti di razze venete a numerosità ridottissima per studiare il profilo biochimico, compreso quello proteico. Gli eiaculati sono stati suddivisi in 8 gruppi dividendo il campione in base al diverso trattamento di diluizione e di composizione del medium (TRIS o latte scremato). Sia i campioni freschi che quelli post-scongelamento sono stati valutati considerando l'integrità di membrana plasmatica utilizzando la tecnica in fluorescenza che considera la traslocazione della fosfotidilserina (Test dell'Annessina V) capace di rilevare il grado di apoptosi cellulare. I risultati di questo esperimento indicano una variabilità della composizione del plasma seminale, anche su base individuale, e che l'eterogeneità degli eiaculati (1° vs 2°) è meglio mantenuta quando si è usato il TRIS nel medium di diluizione. Inoltre , è stato osservato una correlazione negativa significativa tra proteine totali, Mg, P e spermatozoi con assenza di risposta al test di apoptosi. Un'altra interessante relazione positiva è tra la risposta negativa al test di apoptosi e proteine con peso molecolare di 75 kDa. Nel terzo esperimento, seme epididimale, raccolto da soggetti di razze veneto a numerosità ridotta, è stato trattato con TRIS o latte scremato per osservare le caratteristiche post-scongelamento degli spermatozoi. I risultati dimostrano come le qualità spermatiche sono inferiori rispetto agli spermatozoi di eiaculato. Nel quarto esperimento, si è osservato come la dieta può influenzare i componenti del plasma seminale ed in particolare il profilo energetico ela qualità seminale (volume, concentrazione, motilità) in alpaca. Nel quinto esperimento seme di alpaca è stato trattato con 4 differenti tipi di medium di diluizione ed il miglior risultato si è ottenuto utilizzando TRIS con lo 0,8% di fruttosio. Si sono messe in evidenza numerose interessanti correlazioni tra viscosità, % di cellule negative al test dell'apoptosi, Mg, P, proteine totali. In generale si può affermare che la composizione biochimica e la funzione del plasma seminale variano con la dieta e l'eiaculato anche per lo stesso soggetto e tra specie animali. La composizione è un fattore che determina l'utilizzo del singolo soggetto per la conservazione di materiale genetico è dovrebbe esser preso in considerazione per migliorare le tecniche di preparazione di medium di mantenimento o diluizione pre-congelamento per ottimizzare le tecniche di riproduzione assistita negli animali da reddito, per migliorare i programmi di conservazione di razze in pericolo e per migliorare la capacità fertilizzante post-scongelamento.