Human papillomavirus - associated head and neck squamous cell carcinomas in North-East Italy

Il papillomavirus umano (HPV), più frequentemente il tipo 16, sono causalmente associati agli tumori squamosi di testa collo (HNSCC). Questi tumori sono caratterizzati da un'elevata eterogeneità geografica e una migliore risposta alla terapia. L'obiettivo di questo studio è di valutare la prevalenza e l'attività biologica di HPV in HNSCC nel nord dell'Italia. La genotipizzazione per se non è sufficiente a definire il ruolo del virus nella patogenesi HNSCC. E' necessario analizzare e verificare la presenza di altri marker diretti come i trascritti virali, la carica virale, oncoE6 proteine e anticorpi HPV e dei marker indiretti come l'espressione delle proteine cellulari p16INK4a e pRb. I risultati ottenuti sono stati alla fine correlati con la sopravivenza. Nel presente studio sono stati arruolati 247 pazienti del Nord-Est dell'Italia. Sono stati raccolti biopsie tumorale congelate per tutti i pazienti, e per un sottogruppo dei blocchetti di paraffina e del plasma. La presenza del DNA virale è stato determinato con i) reazione a catena della polimerasi con primer consenso MY09/MY11 e tipizzazione con digestione enzimatica e/o ii) BSGP5+/6+ -PCR/Multiplex Papillomavirus Genotype (MPG). I casi HPV DNA positivi sono stati ulteriormente analizzati per: i) carica virale (quantitative PCR); ii) presenza dei trascritti virali (E6*I method); iii) l'espressione delle proteine cellulari p16INK4a e pRb (immunohistochimica, IHC); iv) espressione dell'oncoproteina E6 (OncoE6TM kit, AVC); v) anticorpi anti HPV (Multiplex HPV serology). La prevalenza basata sulla positività del DNA virale era del 9% (21/247). HPV16 è stato trovato nel 95% (20/21) dei casi, 1 HPV58 è stato identificato come infezione singola. La prevalenza basato sul HPV DNA+RNA+ era del 6% (14/244). L'orofaringe era il sito con la più elevata prevalenza di HPV (HPV DNA+ = 27%, HPV DNA+ RNA+ = 20%). 86% (12/14) dei campioni aveva un'alta carica virale per il tipo analizzato; ii) over espressione p16INK4a nel 90% (9/10), down-regulation pRb nel 55% (6/11); iii) la presenza dell'oncoproteina E6 era presente nel 100% (8/8) dei casi testati. La presenza di anticorpi anti HPV è stata valutata in 102 plasmi; 8 su 102 erano positivi per anticorpi HPV, con elevata correlazione con lo status HPV dei relativi tessuto tumorale. Le analisi di Kaplan-Meier per l'orofaringe hanno mostrato un trend di migliore sopravvivenza nei pazienti con tumori HPV positivi per DNA e RNA rispetto ai pazienti HPV negativi. Bassa prevalenza di HPV nei tumori testa collo nel nord dell'Italia confrontato ad altri paesi. L'orofaringe rimane il sito prediletto dell'infezione per l'HPV (27 %). HPV16 era il principale tipo trovato (95%). Migliore sopravvivenza dei pazienti con tumori HPV positivi.