IFI16 è stata collegata a varie funzioni biologiche come: la regolazione del ciclo cellulare, l'apoptosi, la segnalazione dei danni al DNA, identificazione e restrizione di virus. Varie malattie infiammatorie sono state inoltre associate all’anomala espressione e rilascio di IFI16 nello spazio extracellulare. L'ipotesi è che la sovra espressione di IFI16 avvenga in compartimenti tissutali in cui non è fisiologicamente espressa durante l'infiammazione. Conseguentemente, IFI16 viene rilasciato nello spazio extracellulare, dove può funzionare come damage-associated molecular pattern(DAMP) che lega il recettore TLR4 per avviare l'infiammazione da solo o in risposta alle interazioni con molecole esterne, tra cui il LPS batterico. Tuttavia, i precisi meccanismi molecolari alla base della funzione extracellulare di IFI16 come DAMP non sono ancora chiari. In questo progetto sono stati utilizzati macrofagi umani per definire l'attività pro-infiammatoria sia delle subunità ricombinanti di IFI16 o di sue versioni tronche, sia ai domini ricombinanti di altri membri della famiglia PYHIN. In aggiunta, sono stati condotti esperimenti di surface plasmon resonance, previsione strutturale 3D e mutagenesi per identificare la parte di IFI16 responsabile del legame al complesso TLR4/MD2 e relativo pathway indotto. I nostri dati forniscono prove che l'attività pro-infiammatoria della proteina IFI16 risiede specificamente nella sua regione N- terminale e che il suo dominio PYRIN è coinvolto nel legame e nell'attivazione del TLR4/MD2. Inoltre, abbiamo dimostrando che tale attività è conservata tra i membri della famiglia PYHIN e che specifici aminoacidi situati all'interno del PYRIN di IFI16, sono coinvolti direttamente nel legame con TLR4 e con MD2 e nella relativa attivazione. Questi dati rafforzano l'idea che specifici domini PYRIN si comportano come DAMP e possono essere considerati come bersagli di nuovi farmaci per attenuare la risposta infiammatoria in diversi contesti patologici.

The identification of the PYRIN domain as mediator of IFI16-TLR4 interaction reveals a new class of endogenous inflammatory molecules

LACARBONARA, DAVIDE
2024

Abstract

IFI16 è stata collegata a varie funzioni biologiche come: la regolazione del ciclo cellulare, l'apoptosi, la segnalazione dei danni al DNA, identificazione e restrizione di virus. Varie malattie infiammatorie sono state inoltre associate all’anomala espressione e rilascio di IFI16 nello spazio extracellulare. L'ipotesi è che la sovra espressione di IFI16 avvenga in compartimenti tissutali in cui non è fisiologicamente espressa durante l'infiammazione. Conseguentemente, IFI16 viene rilasciato nello spazio extracellulare, dove può funzionare come damage-associated molecular pattern(DAMP) che lega il recettore TLR4 per avviare l'infiammazione da solo o in risposta alle interazioni con molecole esterne, tra cui il LPS batterico. Tuttavia, i precisi meccanismi molecolari alla base della funzione extracellulare di IFI16 come DAMP non sono ancora chiari. In questo progetto sono stati utilizzati macrofagi umani per definire l'attività pro-infiammatoria sia delle subunità ricombinanti di IFI16 o di sue versioni tronche, sia ai domini ricombinanti di altri membri della famiglia PYHIN. In aggiunta, sono stati condotti esperimenti di surface plasmon resonance, previsione strutturale 3D e mutagenesi per identificare la parte di IFI16 responsabile del legame al complesso TLR4/MD2 e relativo pathway indotto. I nostri dati forniscono prove che l'attività pro-infiammatoria della proteina IFI16 risiede specificamente nella sua regione N- terminale e che il suo dominio PYRIN è coinvolto nel legame e nell'attivazione del TLR4/MD2. Inoltre, abbiamo dimostrando che tale attività è conservata tra i membri della famiglia PYHIN e che specifici aminoacidi situati all'interno del PYRIN di IFI16, sono coinvolti direttamente nel legame con TLR4 e con MD2 e nella relativa attivazione. Questi dati rafforzano l'idea che specifici domini PYRIN si comportano come DAMP e possono essere considerati come bersagli di nuovi farmaci per attenuare la risposta infiammatoria in diversi contesti patologici.
2024
Inglese
DE ANDREA, Marco
Università degli Studi del Piemonte Orientale Amedeo Avogadro
Vercelli
123
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Il codice NBN di questa tesi è URN:NBN:IT:UNIUPO-202969