Nanocarriers ricchi di colesterolo nel trattamento dell'HD: preparazione, studio delle variabili tecnologiche, saggi in vivo

Il colesterolo (Col) ਠuno steroide presente in tutte le cellule dell'organismo. Nel cervello, in particolare, svolge importanti funzioni sia strutturali che funzionali. Dati recenti hanno dimostrato che, in alcune patologie, in particolare nella malattia di Huntington (HD), vi ਠuna ridotta sintesi di Col. Purtroppo il Col ਠincapace di attraversare la barriera emato encefalica (BEE) e, per ripristinare i valori funzionali di tale molecola, i ricercatori del gruppo Tefarti di Modena, presso il quale ho svolto la tesi, stanno studiando sistemi nanometrici di veicolazione che opportunamente ingegnerizzati possano rilasciare l'attivo al target. Il mio lavoro di tesi ਠincentrato sull'ottimizzazione di sistemi a base di Col per il ripristino della concentrazione funzionale in cervelli HD. Il primo sistema sviluppato ਠsu base polimerica. In particolare, basandomi su dati disponibili da studi precedenti, mi sono occupata della ottimizzazione di NPs polimeriche ottenute per nanoprecipitazione, inizialmente non direzionate. Sono state allestite preparazioni valutando l'influenza di alcune variabili preparative ( fase organica, temperatura durante la nanoprecipitazione, concentrazione del tensioattivo in fase acquosa, modalità  di allontanamento del solvente dopo la nanoprecipitazione) sulle caratteristiche chimico fisiche delle NPs e sulla stabilità  (dimensioni, distribuzione, carica superficiale, morfologia, tendenza all'aggregazione). Nelle migliori condizioni di preparazione, sono state allestite le g7-Col NPs, addizionando alla preparazione il polimero Col-PEG-g7 sintetizzato nel periodo di tesi. Il lavoro di tesi si ਠconcretizzato successivamente nello studio di un secondo sistema non pi๠su base polimerica, ma liposomiale, capace di trasferire elevate quantità  di Col; i LP mostrano alcuni vantaggi rispetto alle NPs risultando pi๠flessibili e capaci di interagire con diversi meccanismi con le membrane cellulari. Inoltre il Col ਠelemento compositivo notoriamente utilizzato per conferire stabilità  in queste preparazioni. Variando i lipidi utilizzati e i rapporti molari sono state allestite diverse preparazioni, caratterizzate in termini dimensionali, morfologici e superficiali. La preparazione pi๠stabile e riproducibile ਠstata modificata in superficie con il peptide direzionante (g7) mediante reazione di derivatizzazione post-formulazione. Sia le NPs che i LP modificati con il peptide sono stati somministrati in modelli animali non patologici ( wt) per valutare la capacità  di attraversamento della BEE: in questi sistemi, una parte del Col ਠstato sostituito con Col-NBD (Col fluorescente) cosଠda risultare visibile nella successiva analisi dei tessuti al microscopio confocale.