Gli ormoni implicati nella regolazione della funzione gonadica sono ormoni glicoproteici: l'ormone follicolo-stimolante (FSH), l'ormone luteinizzante (LH) e la gonadotropina corionica umana (hCG) . Essi esercitano la loro funzione biologica direttamente legando il loro specifico recettore, cioਠil recettore dell'ormone follicolo-stimolante (FSHR) ed il recettore dell'ormone luteinizzante e della gonadotropina corionica umana (LHCGR). Diversamente da come si credeva, studi recenti hanno dimostrato che i recettori delle gonadotropine si trovano sia in tessuti non riproduttivi e che riproduttivi e quindi la loro espressione non ਠgonado-specifica o cellulo-specifica. L'endometrio à¨, tra i tessuti riproduttivi, uno dei pi๠studiati a causa del suo ruolo critico durante l'impianto dell'embrione, una volta che si verifica la fecondazione in vitro (IVF). A tutt'oggi la presenza di FSHR e LHCGR e il loro ruolo nella fisiologia e nelle patologie dell'endometrio sono ancora in discussione. Mentre gli studi sulla presenza di FSHR nell'endometrio umano sono semplici ma pochi, l'espressione endometriale di LHCGR ਠpi๠controversa, poichà© mentre alcuni studi hanno mostrato LHCGR espressi in tutte le fasi dell'endometrio (proliferativa, secretiva-precoce, secretiva-intermedia, deciduale), altri non sono riusciti a mostrare la sua presenza. In questi studi i campioni di endometrio proliferativo (n=12) sono stati coltivati ed incubati esclusivamente senza ormoni (controllo negativo) o con 10 ng/ml dosaggio di gonadotropina ricombinante (rFSH), LH ricombinante (RLH) e hCG ricombinante (rhCG) da solo o in combinazione. La presenza di FSHR e di LHCGR in endometrio non trattato ਠstata confermata sia da RT-PCR che da immunoistochimica. La valutazione della funzionalità  dei recettori ਠstata eseguita analizzando l'espressione dei geni dell'aromatasi (CYP19A1) e del citocromo P450 (P450scc), notoriamente influenzata dai trattamenti gonadotropinici, tramite RT-qPCR. dopo la normalizzazione dal gene housekeeping della proteina S7 ribosomiale (RpS7) costitutivamente espresso. Per confermare la presenza di recettori per FSH ed LH, i campioni di endometrio sono stati inclusi in paraffina e le sezioni corrispondenti sono state immunocolorate con anticorpi specifici. I risultati ottenuti con questa tesi dimostrano definitivamente la presenza di recettori FSHR e LHR a livello sia proteico che genico nell'endometrio umano. Questi risultati mostrano che il trattamento con gonadotropine potrebbe influenzare la qualità  dell'endometrio e offre nuove informazioni per affrontare meglio i protocolli di impianto IVF/embrione in futuro.

EVIDENZA DELL'ESPRESSIONE DEI RECETTORI PER LE GONADOTROPINE SULL'ENDOMETRIO

2018

Abstract

Gli ormoni implicati nella regolazione della funzione gonadica sono ormoni glicoproteici: l'ormone follicolo-stimolante (FSH), l'ormone luteinizzante (LH) e la gonadotropina corionica umana (hCG) . Essi esercitano la loro funzione biologica direttamente legando il loro specifico recettore, cioਠil recettore dell'ormone follicolo-stimolante (FSHR) ed il recettore dell'ormone luteinizzante e della gonadotropina corionica umana (LHCGR). Diversamente da come si credeva, studi recenti hanno dimostrato che i recettori delle gonadotropine si trovano sia in tessuti non riproduttivi e che riproduttivi e quindi la loro espressione non ਠgonado-specifica o cellulo-specifica. L'endometrio à¨, tra i tessuti riproduttivi, uno dei pi๠studiati a causa del suo ruolo critico durante l'impianto dell'embrione, una volta che si verifica la fecondazione in vitro (IVF). A tutt'oggi la presenza di FSHR e LHCGR e il loro ruolo nella fisiologia e nelle patologie dell'endometrio sono ancora in discussione. Mentre gli studi sulla presenza di FSHR nell'endometrio umano sono semplici ma pochi, l'espressione endometriale di LHCGR ਠpi๠controversa, poichà© mentre alcuni studi hanno mostrato LHCGR espressi in tutte le fasi dell'endometrio (proliferativa, secretiva-precoce, secretiva-intermedia, deciduale), altri non sono riusciti a mostrare la sua presenza. In questi studi i campioni di endometrio proliferativo (n=12) sono stati coltivati ed incubati esclusivamente senza ormoni (controllo negativo) o con 10 ng/ml dosaggio di gonadotropina ricombinante (rFSH), LH ricombinante (RLH) e hCG ricombinante (rhCG) da solo o in combinazione. La presenza di FSHR e di LHCGR in endometrio non trattato ਠstata confermata sia da RT-PCR che da immunoistochimica. La valutazione della funzionalità  dei recettori ਠstata eseguita analizzando l'espressione dei geni dell'aromatasi (CYP19A1) e del citocromo P450 (P450scc), notoriamente influenzata dai trattamenti gonadotropinici, tramite RT-qPCR. dopo la normalizzazione dal gene housekeeping della proteina S7 ribosomiale (RpS7) costitutivamente espresso. Per confermare la presenza di recettori per FSH ed LH, i campioni di endometrio sono stati inclusi in paraffina e le sezioni corrispondenti sono state immunocolorate con anticorpi specifici. I risultati ottenuti con questa tesi dimostrano definitivamente la presenza di recettori FSHR e LHR a livello sia proteico che genico nell'endometrio umano. Questi risultati mostrano che il trattamento con gonadotropine potrebbe influenzare la qualità  dell'endometrio e offre nuove informazioni per affrontare meglio i protocolli di impianto IVF/embrione in futuro.
2018
it
Dipartimento di Scienze Biomediche, Metaboliche e Neuroscienze
Università degli Studi di Modena e Reggio Emilia
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Utilizza questo identificativo per citare o creare un link a questo documento: https://hdl.handle.net/20.500.14242/301433
Il codice NBN di questa tesi è URN:NBN:IT:UNIMORE-301433