Sviluppo di un metodo HPLC con detector UV per la determinazione di benzodiazepine sintetiche

La presente tesi sperimentale di laurea magistrale, svolta presso la University of Pardubice, Department of Analytical Chemistry, sotto la supervisione scientifica del Prof. Petr Cesla nell'ambito del programma Erasmus+ (coordinatore Prof. Federica Pellati), ਠstata focalizzata sullo sviluppo di un metodo HPLC per l'analisi di undici benzodiazepine di sintesi (pyrazolam, nifoxipam, flubromazepam, flubromazolam, desclorazolam, nimetazepam, fenazepam, etizolam, meclonazepam, bentazepam and diclazepam) utilizzando un detector UV. Durante il lavoro sono stati ottimizzati tutti i processi e gli aspetti dell'analisi HPLC per avere una completa separazione delle benzodiazepine oggetto di indagine. Inizialmente, ਠstata ottimizzata la composizione dalla fase mobile, costituita da un tampone fosfato (preparato da una soluzione di Na2HPO4 10 mM che ਠstata aggiunta ad una soluzione di NaH2PO4 10 mM fino al raggiungimento di un pH 7) ed acetonitrile a diverse percentuali ed a diversi gradienti. Ci si ਠquindi indirizzati alla scelta della fase stazionaria, eseguendo prove con una colonna C18, fase stazionaria idrofobica usata quando c'ਠgrande differenza nella polarità  degli analiti, spostandosi poi su una colonna fenilica, che invece interagisce fortemente con gli analiti contenenti un sistema elettronico ï° (aromatici, insaturi), e che trattiene specificatamente questi composti; nello specifico ਠstata utilizzata una colonna feniletilica. Si ਠinoltre valutata la concentrazione del campione, partendo da soluzioni diluite fino a quelle pi๠concentrate, in diversi solventi, al fine di avere una migliore definizione dei picchi e determinazione dei campioni. Infine, ci si ਠrivolti alla ottimizzazione del flusso della fase mobile e del tempo di analisi. Al fine di identificare i composti, sono state condotte analisi anche sulle singole benzodiazepine oggetto di studio. Abbiamo basato il nostro lavoro sulla letteratura scientifica sulle benzodiazepine e sulla separazione in HPLC, in base a questa ed alle evidenze empiriche possiamo affermare di aver definito una procedura per la determinazione in HPLC di benzodiazepine sintetiche.