Studio del ruolo della mRNA-binding-protein Tristetraprolina (TTP) nella psoriasi

La proteina Tristetraprolina (TTP), codificata dal gene Zfp36, ਠuna mRNA-binding-protein coinvolta nella degradazione post-trascrizionale degli mRNA di un vasto pannello di geni coinvolti nella proliferazione cellulare e nell'infiammazione. Tra i target di TTP abbiamo dimostrato esservi NLRP3, scaffold molecolare che permette l'assemblaggio del complesso proteico dell'inflammosoma in cellule coinvolte nel processo immunitario. L'inflammosoma mediato da NLRP3 permette in questi tipi cellulari l'attivazione proteolitica a livello citoplasmatico di citochine pro-infiammatorie (IL-1b) mediante il reclutamento di intermediari (ASC) ed effettori (CASP1). In questo studio ਠstato indagato il ruolo di TTP nella psoriasi, una malattia multigenica e polifattoriale di carattere infiammatorio che causa una caratteristica sintomatologia di iperproliferazione cheratinocitaria con conseguente formazione di placche cutanee, associata a ulteriori co-morbidità . Partendo dall'osservazione del calo di espressione di TTP nella psoriasi, e dato il coinvolgimento dell'inflammosoma nella trasduzione del segnale infiammatorio, ਠstato ipotizzato che NLRP3 e la perdita di regolazione dell'assemblaggio dell'inflammosoma abbiano un ruolo nel quadro patologico della psoriasi. Per validare queste ipotesi e per chiarire il contributo al quadro patologico di diversi tipi cellulari, sono stati utilizzati fibroblasti primari psoriasici e cheratinociti da linea cellulare (HaCat). Mediante Western Blot ਠstata indagata nei due modelli cellulari la modulazione dei livelli proteici di TTP e dei componenti dell'inflammosoma, nonchà© l'attivazione degli effettori della via. Intervenendo in fibroblasti psoriasici sul livello di espressione di TTP mediante infezione con lentivirus, ਠstato possibile ripristinare parzialmente i livelli fisiologici dei componenti dell'inflammosoma da esso regolati e osservare un calo della sua attivazione. Da questi risultati ਠstato possibile confermare la correlazione inversa tra attività  di TTP e attività  dell'inflammosoma, e che la downregolazione di TTP nella psoriasi contribuisce al quadro infiammatorio della malattia mediante la maggiore attività  dell'inflammosoma. Secondariamente, ਠstato indagato lo stato di metilazione del promotore di Zfp36 in qualità  di probabile meccanismo responsabile del calo patologico di TTP nella psoriasi, partendo dall'osservazione di isole e siti CpG lଠpresenti. Attraverso trattamento con inibitori delle DNA metiltransferasi ਠstato possibile osservare il ripristino parziale del livello di espressione di TTP in fibroblasti psoriasici rispetto ai controlli sani; da queste osservazioni, mediante trattamento con bisulfito si ਠindagato lo stato di metilazione a livello di singolo sito CpG sul promotore del gene.