Autoimmune hepatitis: clinical experience after liver transplantation and molecular study using surface plasmon resonance imaging-based strategy

L' epatite autoimmune de novo che insorge in pazienti con recidiva di epatitie C dopo trapianto di fegato è di difficile diagnosi e l' impatto della terapia autoimmune rimane oggetto di discussione. Nella prima parte di questo lavoro lo scopo è stato di valutare le caratteristiche cliniche, sierologiche e istologiche di questi pazienti e il beneficio della terapia autoimmune. I pazienti sono stati inclusi in due centri trapianto europei. Le biopsie epatiche sono state retrospettivamente revisionate da anatomopatologi esperti che hanno valutato tre aspetti, infiltrato plasmacellulare, epatite d' interfaccia e necrosi perivenulare centrale, applicando un nuovo metodo semiquantitativo. La diagnosi finale si è basata sulla prevalenza di lesioni virali: HCV- R, o di lesioni autoimmuni: AIH. Quaranta pazienti sono stati inclusi, 16 (40%) HCV- R e 24 (60%) AIH. L' epatite d' interfaccia di alto grado e la necrosi centrale confluente sono state gli aspetti significativamente più rappresentati nei pazienti AIH, inoltre AST e ALT sono risultate significativamente più elevate nei pazienti AIH. Nessuna differenza è stata riscontrata riguardo all' immunosuppressione di base, aumento delle gammaglobuline o positività autoanticorpale. Alcuna relazione è stata riscontrata tra la terapia antivirale e lo sviluppo di AIH. La spravvivenza è risultata inferiore per i pazienti AIH rispetto ai pazienti HCV- R (65% versus 93%, p=0.050). La terapia autoimmune migliora la citolisi ma non modifica la sopravvivenza (50% pazienti trattati versus 87.5% pazienti non trattati, p=ns), che è compromessa dalla progressione dell' epatite C. Gli anticorpi anti- dsDNA sono altamente diagnostici di lupus eritematoso sistemico (LES), tuttavia possono essere riscontrati anche in altre patologie come l' epatite autoimmune, rimane incerto quali antigeni inducano la produzione di questi autoanticorpi. Inoltre le caratteristiche dell' interazione antigene- anticorpo sono state solo parzialmente elucidate. Nella seconda parte di questo lavoro lo scopo è stato di differenziare le caratteristiche dell' interazione tra dsDNA e anti- dsDNA in pazienti con AIH e LES utilizzando la tecnica innovante Surface Plasmon Resonance imaging (SPRi). I sieri di pazienti con AIH (n=14), LES (n=7), con anti-dsDNA ad alto titolo, riscontrati con il test di Farr, e di controlli sani (n=7) sono stati raccolti. Le IgG e IgM sono state purificate dai sieri. Dieci diversi oligonucleotidi (OG) sono stati immobilizzati sulla superficie del prisma dell' SPRi. La cinetica d' interazione è stata inoltre valutata. I sieri di tutti i pazienti e dei controlli sani hanno mostrato un segnale di attivazione in SPRi, tuttavia una volta iniettate le IgGs monoclonali murine, il segnale è rimasto evidente solo per i pazienti AIH, divenendo debole e quasi inesistente rispettivamente per i pazienti LES e i controlli sani. Dopo l' iniezione delle IgGs purficate, il segnale è stato riscontrato solo per i pazienti AIH. La media delle costanti di dissociazione (koff) è risultata comparabile per tutti i pazienti, a significare che la cinetica di dissocazione era comparabile per tutti i sieri di pazienti AIH. La tecnica SPRi permette di identificare la presenza di interazioni tra dsDNA e anti- dsDNA in pazienti AIH e LES e controlli, utilizzando le IgG purificate il segnale rimane presente solo per i pazienti AIH. Secondo questi risultati è possibile affermare che esiste una differenza tra i complessi immuni presenti nei pazienti AIH rispetto ai pazienti LES che richiedono la presenza di un terzo componente per la forazione o stabilizzazione dei complesso, o, probabilmente riconoscono delle sequenze oligonucleotidiche precise.