Questa tesi si propone di approfondire i ruoli catalitici svolti dai flavoenzimi, provenienti sia da organismi eucariotici che procariotici, nella biosintesi di prodotti naturali. Tali enzimi catalizzano un ampio spettro di reazioni redox dipendenti dall’ossigeno, contribuendo alla formazione di composti naturali complessi e strutturalmente diversificati. La prima parte del lavoro è dedicata all’esplorazione della diversità funzionale delle ossidasi simili all’enzima “berberine bridge” nella ...
Il cancro rimane una delle principali cause di morte globali, con quasi 10 milioni di decessi nel 2022. Tra i tumori più diffusi figurano quelli alla prostata e al rene. Il carcinoma prostatico localizzato è altamente trattabile mediante radioterapia, prostatectomia o deprivazione androgenica, con sopravvivenza relativa a 5 anni prossima al 100%, ma la prognosi crolla al 38% per pazienti con tumore metastatico. Per affrontare questo bisogno clinico, sono stati sviluppati approcci mirati basat...
Lo sviluppo di farmaci biotecnologici come anticorpi monoclonali, frammenti di anticorpi e immuno-citochine ha trasformato il panorama terapeutico di un’ampia gamma di patologie, incluso il cancro. Queste molecole offrono un’elevata specificità ed efficacia. Tuttavia, la loro complessità strutturale e il comportamento eterogeneo in diverse matrici biologiche pongono sfide analitiche significative durante il loro sviluppo. In questo contesto, la spettrometria di massa si è progressivamente aff...
La nicotinamide fosforibosiltransferasi extracellulare (eNAMPT) è un mediatore pro-infiammatorio chiave nelle malattie gastrointestinali croniche a mediazione immunitaria. Questa tesi ne esplora il ruolo nella Gastrite Atrofica Autoimmune (AAG) e nelle Malattie Infiammatorie Croniche Intestinali (IBD), la regolazione tramite fosforilazione e il potenziale terapeutico dell’anticorpo neutralizzante ALT-100 (Aqualung Therapeutics®).
Biopsie gastriche di AAG e controlli sani e fibroblasti deriva...
Il tentativo di produrre eritrociti ex vivo ha condotto allo sviluppo di sistemi di coltura in vitro progettati per mimare le caratteristiche chiave della nicchia midollare. In particolare, è ampiamente adottato un protocollo a tre stadi (espansione, differenziazione eritroide, maturazione/enucleazione), in cui ogni fase richiede un cocktail di citochine specifico, che varia in base alla fonte cellulare e all’assetto sperimentale. Nonostante l’uso diffuso di bioreattori stirred-tank, bottigli...
Il midollo osseo è localizzato nelle cavità trabecolari delle ossa piatte e lunghe ed è la sede dei processi ematopoietici, responsabili della produzione di tutte le cellule del sangue a partire dalle cellule staminali ematopoietiche. La sua struttura, caratterizzata da una rete vascolare densa e disomogenea, presenta due principali nicchie: quella endostale, più vicina all’osso e con matrice rigida, e quella vascolare, situata presso i sinusoidi e con caratteristiche meccaniche più elastiche...
DNA polymerase λ (Pol λ) is a specialised enzyme involved in different DNA repair pathways, including classical Non-Homologous End Joining (NHEJ) and alternative double-strand break repair pathways, as well as in faithful Translesion synthesis (TLS) over 8-oxo-dG. The identification of Pol λ interactors poses significant challenges due to its transient interactions within repair/TLS pathways and the lack of specific and effective antibodies for IF and co-IP. To address this challenge, we have...
Il Coenzima Q (CoQ) è un lipide redox-attivo essenziale, la cui biosintesi richiede la produzione separata delle porzioni testa e coda, la loro fusione e successiva maturazione, processi che coinvolgono diverse proteine COQ organizzate in un metabolone biosintetico. Sebbene la sequenza enzimatica della via sia stata quasi completamente chiarita nei principali organismi modello, rimangono ancora poco compresi alcuni aspetti meccanicistici fondamentali, in particolare quelli che regolano le fas...
L’energia da moto ondoso è ampiamente riconosciuta per la disponibilità a livello globale e la particolare densità energetica, potenzialmente capace di soddisfare la domanda energetica mondiale. Nel corso degli anni sono stati proposti, studiati e testati diversi dispositivi per sfruttare questa fonte di energia. Sono stati realizzati alcuni prototipi a scala reale, in pochi hanno intrapreso una fabbricazione industriale. Tra le tecnologie sviluppate, quella a colonna d’acqua oscillante (OWC)...
La conversione catalitica di idrocarburi leggeri tramite l'attivazione del legame C–H verso reazioni di ossidazione parziale può svolgere un ruolo cruciale nello sviluppo di un futuro sostenibile nella chimica. Infatti, è un modo di valorizzare materie prime economiche e abbondanti, producendo selettivamente i corrispondenti prodotti parzialmente ossigenati, che sono più preziosi per svariati settori industriali.
Le attività descritte in questa Tesi di Dottorato fanno parte di un progetto più...